EGY48酵母化學感受態細胞 返回列表頁

EGY48 Chemically Competent Cell

酵母菌化學感受態細胞

溫馨提示

見我司（懋康生物）整理的酵母雙雜交（Yeast two-hybrid assay）產品專題。

產品標簽

LexA雙雜交系統；EGY48；Y2HGold；pGBKT7；pLexA；Aureobasidin A （AbA）；金擔子素；

產品信息

產品包裝

產品描述

酵母雙雜交系統是用于體內研究蛋白相互作用的一種非常便利的工具，目前采用的有LexA系統和GAL4系統。在LexA系統中，DNA結合域（DNA- BD）由一個完整的原核蛋白LexA構成，轉錄激活域（AD）由一個大腸桿菌來源的含88個氨基酸殘基的酸性肽B42構成），在酵母中能活化基因的轉錄。正常情況，BD和AD不會結合，將待檢測的蛋白質分別與BD和AD融合，形成誘餌融合蛋白（bait-DNA）和誘捕融合蛋白（prey-DNA），只有當誘餌和誘捕蛋白發生相互作用，促使BD和AD的相互接近，才能激活報告基因的轉錄。

EGY48是LexA系統酵母雙雜交用實驗菌株，MATα型，能直接轉化質粒進行蛋白相互作用驗證或雙雜交文庫篩選和構建。轉化標記為ura3，his3，trp1。報告基因為LEU2。EGY48-LexA酵母雙雜交系統需要三種質粒配套使用，分別為pLexA、pB42AD和p8op-LacZ。質粒pLexA的篩選標志為HIS3，用于表達誘餌融合蛋白。pB42AD的篩選標志為TRP1，用于表達誘捕融合蛋白。報告質粒p8op-LacZ的篩選標志為URA3，報告基因為LacZ，報告基因UAS來源于LexA op (x6)，只有當誘餌（Bait）和誘捕（Prey）相互作用才能啟動LacZ表達。

本品為經特殊工藝制備的EGY48酵母菌化學感受態細胞，用pGBKT7質粒檢測轉化效率＞10⁴cfu/μg DNA。且在-80℃能穩定保存三個月。

基因型

MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-LEU2

注意事項

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 取100 µl冰上融化的EGY48化學感受態細胞，依次加入預冷的目的質粒2-5 µg，Carrier DNA （95-100℃ 孵育5 min，快速冰浴。重復一次。）10 µl，PEG/LiAc 500µl，用槍吹打幾次充分混勻，30℃水浴30 min（在15min時翻轉6-8次混勻）。
2. 之后將管子放42℃水浴15 min（在7.5min時翻轉6-8次混勻）。
3. 5000 rpm離心40s棄上清，用400 µl ddH₂O重懸沉淀，離心30s棄上清。
4. 用50 µl ddH₂O重懸，涂板，放入29℃培養48-96 h。

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。

EGY48酵母化學感受態細胞

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