血清中含有蛋白質、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白質主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種,是細胞合成蛋白質的基本成分。
Gibco胎牛血清
胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質zui高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分少。
血清中含有蛋白質、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白質主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種,是細胞合成蛋白質的基本成分,其中有些氨基酸動物細胞本身不能合成(稱為必需氨基酸),必須由培養液提供。血清激素有胰島素、生長激素等及多種生長因子(如表皮生長因子、成纖維細胞生長因子、類胰島素生長因子等);血清還含有多種未知的促細胞生長因子、促貼附因子及其他活性物質,能促進細胞的生長、增殖和貼附。
Gibco胎牛血清使用中的注意事項:
1、血清儲存和解凍:建議血清保存在-20℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍,避免反復凍融。血清解凍,將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融(建議:融解過程中不時規則地搖晃均勻)、
2、如何選擇血清:血清產品因牛個體、環境變化批次間存在較大差異,選擇血清產品要看重批次,國外*有品牌優勢,但也不是每批產品都值得信賴。李記血清,每一批次都要進行多項指標測試,并由專業實驗室進行十余種養細胞培養檢測后才推向市場,我們zui大程度的確保產品批次間穩定,提高實驗重現性。
3、哪些原因容易導致血清產生沉淀:1)溫度改變太大,血清由-20℃直接放入37℃解凍,因溫度改變劇烈容易導致沉淀;2)血清放置37℃時間太久,血清中的不穩定成分會被破壞,導致血清品質變差,也會產生沉淀;3)血清分裝凍存時,注意在不產生氣泡的情況下搖晃均勻,避免因成分不均勻導致部分血清成分濃度改變產生沉淀;4)血清滅活非常容易產生沉淀,如必須滅活請按56℃,30分鐘,輕微搖晃原則操作,滅活溫度高、時間長、搖晃不均都容易產生沉淀。
4、血清是否滅活:加熱可滅活血清中補體系統,在極少數情況下(培養ES細胞,平滑肌細胞時)建議滅活,在培養其余細胞時不建議滅活血清。
5、無血清培養基:無血清培養基在結果重復性、細胞體外分化方面有優勢,但是,血清仍然是培養液中zui基本的添加物,尤其是在原代培養或細胞生長狀態不良時,常常會先使用有血清的培養液進行培養,待細胞生長旺盛后再換成無血清培養液。