上海莼試生物技術有限公司

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    T25CV-1細胞
    CV-1細胞
    參考價 面議
    具體成交價以合同協議為準
    • 型號 T25
    • 品牌 其他品牌
    • 廠商性質 經銷商
    • 所在地 上海市

    更新時間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數:246

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    【簡單介紹】
    產品名稱 非洲綠猴腎細胞;CV-1 英文名稱 CV-1
    規格 T25 貨號 CS-X63566
    CV-1細胞公司相關產品:
    *受體紅藻氨酸離子2/*受體6抗體MCP-2/CCL8/FITC 熒光素標記單核趨化蛋白2抗體(人)IgG
    *受體紅藻氨酸離子3/*受體7抗體MCP-2/CCL8/FITC 熒光素標記單核趨化蛋白2抗體(大、小鼠)IgG

    細胞培養的優點:
    1.研究的對象是活細胞
    在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
    2.研究條件可以人為控制
    pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
    3.研究的樣本可以達到比較均一性
    通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
    4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
    采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
    公司產品僅用于科研以下是細胞的訂購信息:

    英文簡稱:CV-1細胞    

    產品名稱:非洲綠猴腎細胞;CV-1

    規格:T25

    形態特性:成纖維細胞樣

    生長特性:貼壁生長

    特征特性:CV-1細胞株是1964年由JensenFC等建系的,源自成年雄性非洲綠猴腎,被用于Rous肉瘤病毒的轉染研究。可作為SV40載體的轉染宿主。

    培養條件:RPMI1640+10%FBS

    傳代方法:1:2傳代

    貨號:CS-X63566

    圖片13.jpg 

    注意事項:
    1)凍存前細胞狀態,細胞*在對數生,細胞密度適合,剛剛發生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態不好,而且消化時不容易分散;
    2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
    3)消化和吹打,切忌*消化過度,吹打不可太用力,*不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
    4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節約處就節約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
    5)關于“慢凍",傳統的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
    實驗報告
    一、產分離與培養:
       1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將*成1mm3左右大??;
       2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% *和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
       3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
       4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
       5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
    二、免疫熒光鑒定:
       1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
       2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
       3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
       4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
       5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
       6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
    細胞培養操作規程:
    一.培養基及培養凍存條件準備:
    1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
    2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
    3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
    二.細胞處理:
    1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
    2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
    對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
    方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
    BRIJ?O20聚氧乙烯20油Botryosphaeria obtusa拉丁屬名: Pseudomonas  frederiksbergensis

    BRIJ?O20聚氧乙烯20油佛雷德里克斯堡假單胞菌拉丁屬名: Pleurotus ostreatus

    BRIJ?O20聚氧乙烯20油糙皮側耳注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

    聚乙二單硬脂酯淡紫擬青霉拉丁屬名: Aspergillus  awamori

    聚乙二單硬脂酯泡盛曲霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

    聚乙二單硬脂酯孢青霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

    聚乙二單硬脂酯禽腺病Ⅴ型拉丁屬名: Streptomyces janthinus

    聚乙二單硬脂酯紫花鏈霉菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

    聚乙二單硬脂酯禾谷絲核菌拉丁屬名: Aspergillus  niger

    聚乙二單硬脂酯黑曲霉拉丁屬名: Naumannella? halotolerans

    聚乙二單硬脂酯Naumannella?注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

    聚乙二單硬脂酯鐮刀菌用途: 教學科研

    聚乙二單硬脂酯麥根腐平臍蠕孢拉丁屬名: coli

    聚乙二單硬脂酯大腸埃希菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

    聚乙二單硬脂酯云芝注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

    鄰苯二樟疫霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
    CV-1細胞鹽美卡因Human

    鹽帕他莫Human, Mouse

    鹽哌維林Human

    鹽*Human, Mouse

    鹽氮卓斯汀Human, Mouse

    鹽地芬尼多Human, Mouse

    鹽丁卡因Human, Mouse, Rat




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