上海莼試生物技術有限公司

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    非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A
    非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A
    參考價 面議
    具體成交價以合同協議為準
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    • 廠商性質 經銷商
    • 所在地 上海市

    更新時間:2017-06-01 08:52:53瀏覽次數:336

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    【簡單介紹】
    非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A,采用干冰保存運輸收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養;若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環境。

    公司是*的ATCC細胞供應商,提供非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購
    細胞名稱     非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A        
    形態特性      上皮樣細胞        
    生長特性     貼壁生長        
    特征特性      Vero-HCV-NS4A細胞整合有丙型肝炎病毒的NS4A基因,能穩定表達NS4A蛋白,是HCV基礎研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室郭佳博士于2008年構建并保存。         
    培養條件      DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS         
    傳代方法      1:3傳代,2-3天傳一代        
    傳代情況     C24        
    凍存條件      基礎培養基+5%DMSO+20%FBS         
    支原體檢測     陰性         
    STR             
    同工酶     同工酶鑒定        
    染色體             
    使用權限     A類
    培養需要滿足以下條件
    1、無菌、無毒的環境:首先應保證被培養的細胞處于無菌、無毒的環境,即對培養液和所有的培養用具進行無菌處理。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素以防培養過程中的污染。

    2、營養物質:細胞體外培養所需營養物質與體內基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

    3、溫度和pH:細胞體外培養的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。

    4、氣體環境:培養所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養液的pH。進行細胞培養時,通常采用培養皿或松蓋培養瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養箱中進行培養。

    操作步驟:
    1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
    2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
    3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
    4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
    5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
    6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
    7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
    8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
    9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
    10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
    11. 鏡檢觀察。

    ADIPOQ     cDNA    Mouse    小鼠 ADIPOQ 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
    ADIPOQ     cDNA    Mouse    小鼠 ADIPOQ 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
    CTLA4     cDNA    Mouse    小鼠 CTLA4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
    CTLA4     cDNA    Mouse    小鼠 CTLA4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
    PDGFA     cDNA    Mouse    小鼠 PDGFA 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
    PDGFA     cDNA    Mouse    小鼠 PDGFA 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
    CD80     cDNA    Mouse    小鼠 B7-1 / CD80 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
    CD80     cDNA    Mouse    小鼠 B7-1 / CD80 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
    CD5     cDNA    Mouse    小鼠 CD5 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
    TIMD4     cDNA    Mouse    小鼠 TIMD4 / TIM4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
    TNFSF13B     cDNA    Mouse    小鼠 BAFF / TNFSF13B 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
    TNFSF13B     cDNA    Mouse    小鼠 BAFF / TNFSF13B 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
    TNFSF11     cDNA    Mouse    小鼠 TNFSF11 / CD254 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
    RSPO1     cDNA    Mouse    小鼠 RSPO1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
    RSPO1     cDNA    Mouse    小鼠 RSPO1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
    ANGPT2     cDNA    Mouse    小鼠 ANGPT2 / ANG2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
    ANGPT2     cDNA    Mouse    小鼠 ANGPT2 / ANG2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
    TGFBR1     cDNA    Mouse    小鼠 TGFBR1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
    IL13     cDNA    Mouse    小鼠 IL13 / ALRH 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
    IL13     cDNA    Mouse    小鼠 IL13 / ALRH 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
    TNFSF10     cDNA    Mouse    小鼠 TNFSF10 / TRAIL 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
    TNFSF10     cDNA    Mouse    小鼠 TNFSF10 / TRAIL 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
    TLR3     cDNA    Mouse    小鼠 TLR3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
    VEGFA     cDNA    Mouse    小鼠 VEGF-A 轉錄變體3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
    VEGFA     cDNA    Mouse    小鼠 VEGF-A 轉錄變體3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽



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