上海莼試生物技術有限公司
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更新時間:2017-06-06 09:40:39瀏覽次數:378
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公司是*的ATCC細胞供應商,提供人肺成纖維細胞;HFL1的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購。
細胞名稱 人肺成纖維細胞;HFL1
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養條件 F12K 優質胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(10+5)
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類培養需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環境:首先應保證被培養的細胞處于無菌、無毒的環境,即對培養液和所有的培養用具進行無菌處理。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素以防培養過程中的污染。
2、營養物質:細胞體外培養所需營養物質與體內基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細胞體外培養的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環境:培養所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養液的pH。進行細胞培養時,通常采用培養皿或松蓋培養瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養箱中進行培養。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的*培養基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的*培養基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得。
細胞用途:僅供科研使用。
大鼠胰腺外分泌細胞
細胞介紹
在腎上腺皮質激素刺激下可誘導出外分泌活性,并伴有廣泛的內質網重構。
細胞特性
來源:胰腺外分泌細胞腫瘤
形態:上皮細胞樣
含量:>1x106 個/mL
污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存:使用含有優質胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入使用的培養基后轉移至10cm培養皿或者T25培養瓶中培養,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存
大鼠嗜堿性白血病細胞
細胞介紹
RBL-2H3是1978年國立牙科研究所的免疫學實驗室從Wistar大鼠保持腫瘤狀態的嗜堿性細胞中分離和克隆出來的嗜堿性白血病細胞株。這些細胞具有高親和力的IgE受體。通過集聚這些受體或與鈣離子載體協同作用可以激活它們分泌組胺及其他遞質。這株細胞廣泛地用于研究肥大細胞FcERI和分泌的生化途徑。RBL-2H3細胞是研究FcERI結構的模型。它們廣泛地用于研究細胞分泌的不同方面,包括細胞內鈣濃度改變、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。雖然幾乎所有批號的FBS都支持細胞的生長,但在某些批號中FcERI集聚后脫?;酶?。另一株大鼠嗜堿性細胞株(RBL,ATCC CRL-1378)不會脫?;?nbsp;
細胞特性
1)來源:大鼠外周血
2)形態:成纖維細胞
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存:使用含有優質胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入使用的培養基后轉移至10cm培養皿或者T25培養瓶中培養,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。
大鼠腦I型星形膠質細胞
大鼠腦間質細胞
大鼠腦膠質瘤細胞
細胞介紹
膠質細胞株C6是由Benda等用N-nitrosomethylurea誘導的大鼠膠質瘤克隆,并經過一系列的體外培養和動物傳代交替后建成的。當細胞從低密度生長到滿瓶時,S-100產量增加10倍。
細胞特性
來源:大鼠,膠質瘤
形態:成纖維細胞,貼壁生長
含量:>1x106 個/mL
污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存:使用T25瓶充液發送活細胞。收到細胞后,請先在顯微鏡下檢查細胞生長狀態,并將T25瓶置于培養箱約6h或過夜后,再次檢查細胞狀態。若狀態良好,可按照以下細胞培養步驟進行細胞后續處理操作。若發現可疑污染物,請及時與我們取得。
細胞用途:僅供科研使用。
大鼠腦星形膠質細胞
細胞特性
1)來源:腦
2)含量:>1x106 個/mL
3)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
4)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存:可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;(2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。
大鼠垂體瘤細胞
細胞介紹
GH3細胞系是由Tashjian AH等在1965年7月從一只7月齡的雌性Wistar-Furth大鼠的垂體腫瘤中分離建立的。GH3細胞系不是直接來源于GH1細胞系的克隆,而是從原代培養的GH1細胞在大鼠身上傳代兩次形成的腫瘤中建立的。上皮樣的GH3細胞比GH1分泌更高水平的生長激素,也可產生催乳素。對調控GH3細胞分泌蛋白類激素的研究表明,可以刺激生長激素的分泌、抑制催乳素的產生。
細胞特性
1) 來源:大鼠,垂體瘤
2) 形態:上皮細胞樣,疏松貼壁,有漂浮的細胞簇
3) 含量:>1x106 個/mL