上海莼試生物技術有限公司
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更新時間:2017-06-06 10:12:08瀏覽次數:328
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公司是*的ATCC細胞供應商,提供人胚肺成纖維細胞;Walvax-2的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購。
細胞名稱 人胚肺成纖維細胞;Walvax-2
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定培養需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環境:首先應保證被培養的細胞處于無菌、無毒的環境,即對培養液和所有的培養用具進行無菌處理。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素以防培養過程中的污染。
2、營養物質:細胞體外培養所需營養物質與體內基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細胞體外培養的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環境:培養所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養液的pH。進行細胞培養時,通常采用培養皿或松蓋培養瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養箱中進行培養。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
機理以及發展新的治療方法。
細胞特性
1)組織來源于實驗動物的正常腹腔主動脈組織。
2)細胞鑒定:血小板-內皮細胞粘附分子(PECAM-1/CD31)或血管假性血友病子(WF)免疫熒光染色為陽性。
3)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:鋪路石狀細胞,不規則細胞,貼壁培養。
腹腔主動脈平滑肌細胞
細胞詳述
腹腔主動脈是人體的大動脈,直接延續于發自左心室的主動脈,胸腔主動脈,沿脊柱左側下行,主要負責腹腔臟器和腹壁的血液供應。動脈疾病發生的一個主要素是由于血管平滑肌細胞轉變成為了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌細胞能表達鈣離子通道,ICAM-1和CAM-1。其中ICAM-1和CAM-1的表達可能是造成血管壁炎癥反應,并進一步造成血管疾病的原 。此,對動脈血管平滑肌細胞的體外培養和研究可用來發現和確定新的血管疾病的靶向治療方法。
細胞特性
1)組織來源于實驗動物的正常腹腔主動脈組織。
2)細胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性。
3)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:長梭形細胞,不規則細胞,貼壁培養。
腹腔主動脈外膜成纖維細胞
細胞詳述
腹腔主動脈是人體的大動脈,直接延續于發自左心室的主動脈,胸腔主動脈,沿脊柱左側下行,主要負責腹腔臟器和腹壁的血液供應。主動脈是由內膜、中層彈力層和外膜構成,三層緊密貼合在一起。其中,外膜是專門的支持組織,外膜成纖維是外膜的主要成分,在血管炎癥反應、血管重塑等方面發揮重要作用。
細胞特性
1)組織來源于實驗動物的正常主動脈組織。
2)細胞鑒定:波形蛋白(imentin)免疫熒光染色為陽性。
3)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:長梭形細胞,不規則細胞,貼壁培養。
股動脈內皮細胞
細胞詳述
股動脈是下肢動脈的主干,由髂外動脈延續而來。在腹股溝韌帶中點的深面入股三角。在股三角內,股動脈先位于股靜脈的外側,逐漸從外側跨到股靜脈的前方,下行入收肌管,再穿收肌腱裂孔至腘窩,易名腘動脈。股動脈在腹股溝中點處位置表淺,可摸到搏動,是臨床上急救壓迫止血和進行穿刺的部位。股動脈動脈內皮細胞組成了動脈內壁,并持續受到血流剪切應力的影響。內皮細胞在切應力的作用下,分泌不同的內皮子并進而影響血管收縮和生長。主動脈內皮細胞也調節細胞黏附分子的表達來控制和精確調節炎癥反應和組織纖維化。體外培養的原代股動脈內皮細胞可有效地幫助研究者研究內皮功能失調的機理,動脈粥樣化等疾病的發病機理以及發展新的治療方法。
細胞特性
1)組織來源于實驗動物的正常股動脈組織。
2)細胞鑒定:血管假性血友病子(WF)免疫熒光染色為陽性。
3)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:鋪路石狀細胞,不規則細胞,貼壁培養。
股動脈平滑肌細胞
細胞詳述
股動脈是下肢動脈的主干,由髂外動脈延續而來。在腹股溝韌帶中點的深面入股三角。在股三角內,股動脈先位于股靜脈的外側,逐漸從外側跨到股靜脈的前方,下行入收肌管,再穿收肌腱裂孔至腘窩,易名腘動脈。股動脈在腹股溝中點處位置表淺,可摸到搏動,是臨床上急救壓迫止血和進行穿刺的部位。動脈疾病發生的一個主要素是由于血管平滑肌細胞轉變成為了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌細胞能表達鈣離子通道,ICAM-1和CAM-1。其中ICAM-1和CAM-1的表達可能是造成血管壁炎癥反應,并進一步造成血管疾病的原 。此,對動脈血管平滑肌細胞的體外培養和研究可用來發現和確定新的血管疾病的靶向治療方法。
細胞特性
1)組織來源于實驗動物的正常股動脈組織。
2)細胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性。
3)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:長梭形細胞,不規則細胞,貼壁培養。
肺微血管內皮細胞
細胞詳述
肺微血管內皮細胞構成半選擇性屏障,該屏障對于肺氣體交換,調節液體和可溶物在血液與肺間質之間的流動具有重要意義。它還具有代謝功能,可以執行一定的非呼吸功能。在肺損傷中,肺微血管內皮細胞是活性氧類的重要靶細胞之一。在肺炎的發生過程中,神體液介質和氧化劑作用于內皮細胞,使得細胞間隙滲透性增加,蛋白質由血液進入間質。細胞間隙滲透性的增加導致低氧血癥,出現成人呼吸窘迫綜合征和非心源性肺水腫。
細胞特性
1)細胞來源于實驗動物的正常肺組織。
2)細胞鑒定:血管假性血友病子(WF)免疫熒光染色為陽性
。
3)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,多角形細胞,貼壁培養。