上海莼試生物技術有限公司
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更新時間:2017-06-08 12:04:14瀏覽次數:343
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公司是*的ATCC細胞供應商,提供EB病毒轉化的人B淋巴細胞(傣族);KM9403的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購。
細胞名稱 EB病毒轉化的人B淋巴細胞(傣族);KM9403
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞來源于一傣族女性的外周血。1994年由昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類 培養需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環境:首先應保證被培養的細胞處于無菌、無毒的環境,即對培養液和所有的培養用具進行無菌處理。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素以防培養過程中的污染。
2、營養物質:細胞體外培養所需營養物質與體內基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細胞體外培養的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環境:培養所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養液的pH。進行細胞培養時,通常采用培養皿或松蓋培養瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養箱中進行培養。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
粒徑:60-200μm
工作PH值:4-9
操作溫度:4-40℃
分離范圍:70,000-40 ×106
保存條件:4-8℃
應用:蛋白、大分子復合物、病毒、核酸、多糖的分離、分子量測定等
中文名稱:瓊脂糖凝膠4FF
英文名字:Sepharose 4FF
性狀:白色微球, 無嗅、無味
凝膠類型:凝膠過濾填料;快流速,物理與化學性質穩定。
產品基質:4%瓊脂糖
粒徑:45-165μm
工作PH值:3-13
操作溫度:4-40℃
分離范圍:70,000-20 ×106
保存條件:4-8℃
應用:巨大分子,病毒,疫苗的分離純化等
中文名稱:瓊脂糖凝膠6FF
英文名字:Sepharose 6FF
性狀:白色微球, 無嗅、無味
凝膠類型:凝膠過濾填料;快流速,物理與化學性質穩定。
產品基質:6%瓊脂糖
粒徑:45-165μm
工作PH值:3-13
操作溫度:4-40℃
分離范圍:10,000-4 ×106
保存條件:4-8℃
應用:巨大分子,病毒,疫苗的分離純化等
中文名稱:瓊脂糖凝膠CL-4B
英文名字:Sepharose CL-4B
性狀:白色微球, 無嗅、無味
凝膠類型:凝膠過濾填料;反復交聯,化學與物理性質更加穩定。
結構成分:6%交聯度瓊脂糖
粒徑:45-165μm
工作PH值:3-13
操作溫度:4-40℃
分離范圍:10,000-4 ×106
保存條件:4-8℃
應用:蛋白、多肽、多糖的分離、分子量測定等
中文名稱:瓊脂糖凝膠CL-6B
英文名字:Sepharose CL-6B
性狀:白色微球,無嗅、無味
凝膠類型:凝膠過濾填料;反復交聯,化學與物理性質更加穩定。
結構成分:6%交聯度瓊脂糖
粒徑:45-165μm
工作PH值:3-13
操作溫度:4-40℃
分離范圍:10,000-4 ×106
保存條件:4-8℃
應用:蛋白、多肽、多糖的分離、分子量測定等
中文名稱:瓊脂糖凝膠CL-2B
英文名字:Sepharose CL-2B
性狀:白色微球, 無嗅、無味
凝膠類型:凝膠過濾填料;反復交聯,化學與物理性質更加穩定。
結構成分:2%交聯度瓊脂糖
粒徑:60-200μm
工作PH值:3-13
操作溫度:4-40℃