上海莼試生物技術有限公司

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    tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3
    tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3
    參考價 面議
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    更新時間:2017-06-09 11:03:06瀏覽次數:310

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    【簡單介紹】
    tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3
    ,采用干冰保存運輸收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養;若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環境。

    公司是*的ATCC細胞供應商,提供 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3
    的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購。
    細胞名稱 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3
    形態特性  多角
    生長特性 貼壁生長
    特征特性  轉染pCAG-tTA質粒,經2.0ug/ml puromycin篩選,為Tet-off穩定調控細胞系,受Dox調控倍數在20~50倍。細胞倍增時間為24小時。
    培養條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  5%FBS + 2.0ug/ml puromycin
    傳代方法  1:4傳代,2~3天傳代一次。
    傳代情況
    凍存條件  基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
    支原體檢測 培養法(-)
    STR  -
    同工酶
    染色體
     
    使用權限 B類培養需要滿足以下條件
    1、無菌、無毒的環境:首先應保證被培養的細胞處于無菌、無毒的環境,即對培養液和所有的培養用具進行無菌處理。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素以防培養過程中的污染。

    2、營養物質:細胞體外培養所需營養物質與體內基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

    3、溫度和pH:細胞體外培養的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。

    4、氣體環境:培養所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養液的pH。進行細胞培養時,通常采用培養皿或松蓋培養瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養箱中進行培養。
    操作步驟:
    1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
    2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
    3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
    4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
    5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
    6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
    7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
    8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
    9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
    10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
    11. 鏡檢觀察。
    8(KLK8)ELISA試劑盒 * ,英文名: KLK8 ELISA Kit
    7(KLK7)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: KLK7 ELISA Kit
    6(KLK6)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: KLK6 ELISA Kit
    5(KLK5)ELISA試劑盒 * ,英文名: KLK5 ELISA Kit
    4(KLK4)ELISA試劑盒 * ,英文名: KLK4 ELISA Kit
     
    3(KLK3)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: KLK3 ELISA Kit
    2(KLK2)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: KLK2 ELISA Kit
    15(KLK15)ELISA試劑盒 * ,英文名: KLK15 ELISA Kit
    14(KLK14)ELISA試劑盒 * ,英文名: KLK14 ELISA Kit
    13(KLK13)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: KLK13 ELISA Kit
    12(KLK12)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: KLK12 ELISA Kit
    11(KLK11)ELISA試劑盒 * ,英文名: KLK11 ELISA Kit
    10(KLK10)ELISA試劑盒 * ,英文名: KLK10 ELISA Kit
    1(KLK1)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: KLK1 ELISA Kit
    激素敏感性脂肪酶(LIPE)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: LIPE ELISA Kit
    激活素受體樣激酶1(ALK1)ELISA試劑盒 * ,英文名: ALK1 ELISA Kit
    激活素B(ACVB)ELISA試劑盒 * ,英文名: ACVB ELISA Kit
    激活素A受體ⅡA(ACVR2A)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: ACVR2A ELISA Kit
    激活素A受體Ⅰ(ACVR1)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: ACVR1 ELISA Kit
    激活素AB(ACVAB)ELISA試劑盒 * ,英文名: ACVAB ELISA Kit
    激活素A(ACVA)ELISA試劑盒 * ,英文名: ACVA ELISA Kit
    激活蛋白C(APC)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: APC ELISA Kit
    激活STAT蛋白抑制因子1(PIAS1)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: PIAS1 ELISA Kit
    畸胎瘤衍生生長因子1(TDGF1)ELISA試劑盒 * ,英文名: TDGF1 ELISA Kit
    基質重塑關聯蛋白8(MXRA8)ELISA試劑盒 * ,英文名: MXRA8 ELISA Kit
    基質重塑關聯蛋白5(MXRA5)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: MXRA5 ELISA Kit
    基質細胞衍生因子4(SDF4)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: SDF4 ELISA Kit
    基質細胞衍生因子2(SDF2)ELISA試劑盒 * ,英文名: SDF2 ELISA Kit
    基質細胞衍生因子1(SDF1)ELISA試劑盒 * ,英文名: SDF1 ELISA Kit
    基質抗原3(STAG3)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: STAG3 ELISA Kit
    基質抗原2(STAG2)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: STAG2 ELISA Kit
    基質抗原1(STAG1)ELISA試劑盒 * ,英文名: STAG1 ELISA Kit
    基質金屬蛋白酶9(MMP9)ELISA試劑盒 * ,英文名: MMP9 ELISA Kit
    基質金屬蛋白酶8(MMP8)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: MMP8 ELISA Kit
    基質金屬蛋白酶7(MMP7)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: MMP7 ELISA Kit
    基質金屬蛋白酶3(MMP3)ELISA試劑盒 * ,英文名: MMP3 ELISA Kit
    基質金屬蛋白酶28(MMP28)ELISA試劑盒 * ,英文名: MMP28 ELISA Kit
    基質金屬蛋白酶27(MMP27)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: MMP27 ELISA Kit
    基質金屬蛋白酶26(MMP26)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: MMP26 ELISA Kit
    基質金屬蛋白酶24(MMP24)ELISA試劑盒 * ,英文名: MMP24 ELISA Kit
    基質金屬蛋白酶23B(MMP23B)ELISA試劑盒 * ,英文名: MMP23B ELISA Kit
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    基質金屬蛋白酶21(MMP21)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: MMP21 ELISA Kit
     



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