上海莼試生物技術有限公司
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更新時間:2021-06-07 14:49:20瀏覽次數:627
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產品名稱:Smart Assembly Cloning kit
2.產品說明
Smart Assembly Cloning Kit 是一種簡單、快速并且高效的DNA無縫克隆試劑盒,可將插入片段定向克隆至任意載體的任意位點。使用任意方式將載體進行線性化,在插入片段正/反向PCR引物5’端引入線性化載體的末端序列,使得PCR產物5’和3’最末端分別帶有和線性化載體兩末端一致的序列(25bp -40 bp)。這種兩端帶有載體末端序列的PCR產物和線性化載體按一定比例混合后,在重組酶的催化下,50℃反應15 min即可進行轉化,完成定向克隆。作為新一代的重組克隆試劑盒,相比同類產品,其核心優勢在于專門針對多片段重組反應進行優化,可以一次實現多至12個插入片段的順序拼接克隆。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
公司主營產品:
生化試劑:抗生素、維生素、培養基、染色劑、酶/輔酶、碳水化合物、分離試劑、緩沖試劑、核酸及衍生物、氨基酸/蛋白質等其它生化試劑,我們提供各種L-56-41-7品牌。
分子生物學:核酸電泳、DNA Marker、克隆表達、PCR/Q-PCR、RT-PCR、基因組提取、質粒提取、RNA提取、DNA純化回收、核酸純化相關試劑。
細胞培養:血清、培養基、平衡鹽溶液、輔助添加試劑、細胞檢測試驗。
蛋白質研究:蛋白電泳、蛋白提取、蛋白純化、蛋白定量、組織/蛋白染色。
免疫學:抗體、免疫組化、ELISA、免疫印跡WB。
豬粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)免疫試劑盒 phospho-ASK1 (Ser967) 磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體
豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)免疫試劑盒 phospho-ASK1 (Thr845) 磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體
豬粘蛋白/粘液素2(MUC2)免疫試劑盒 phospho-ATF2 (Thr69/71) 磷酸化活化復制因子2抗體
豬粘蛋白/粘液素1(MUC1)免疫試劑盒 Phospho-ATP1A1 (Tyr10) 磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體
豬早老素2(PS-2)免疫試劑盒 Phospho-ATP1A1 (Ser16) 磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體
豬早老素1(PS-1)免疫試劑盒 Acetyl CoA Carboxylase 乙酰羧化酶抗體
豬載脂蛋白E(Apo-E)免疫試劑盒 Phospho-Acetyl Coenzyme A carboxylase alpha (Ser78) 磷酸化乙酰羧化酶抗體
豬載脂蛋白B100(apo-B100)免疫試劑盒 Phospho-Ack1 (Tyr859 + 860) 磷酸化Ack1抗體
豬載脂蛋白A5(apo-A5)免疫試劑盒 phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
豬載脂蛋白A1(apo-A1)免疫試劑盒 phospho-AMPK beta 1 (Ser108) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體
豬甾體合成急性調節蛋白(StAR)免疫試劑盒 phospho-ALK (Tyr1604) 磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體
豬孕激素/孕酮(PROG)免疫試劑盒 phospho-ATM(Ser1981) 磷酸化毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體
豬誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)免疫試劑盒 phospho-ATP citrate lyase (Ser455) 磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體
豬游離脂肪酸(FFA)免疫試劑盒 phospho-ATR (Ser428) 磷酸化ATR抗體
豬游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)免疫試劑盒 AMN1 細胞核重定位及紡錘體檢查點蛋白AMN1抗體
豬游離甲狀腺素(FT4)免疫試劑盒 ALG11 天連接糖基化11抗體
豬乙酰受體抗體(AChRab)免疫試劑盒 ASF1A 細胞衰老相關蛋白ASF1A抗體
豬胰高血糖素樣肽2(GLP2)免疫試劑盒 AGPHD1 氨基糖苷類磷酸結構域蛋白抗體
豬胰高血糖素樣肽1(GLP1)免疫試劑盒 ASGPR1 唾液酸糖蛋白受體1抗體
豬胰高血糖素(GC)免疫試劑盒 ARSF 芳香基硫酸酯酶F抗體
豬胰α2(PAMY α2)免疫試劑盒 AKAP5 A激酶錨定蛋白5抗體
豬胰島素原(PI)免疫試劑盒 ATXN3L 小腦脊髓共濟失調蛋白3抗體
豬胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)免疫試劑盒 ASTE1 ASTE1蛋白抗體
豬胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)免疫試劑盒 phospho-APG4B(Ser309) 磷酸化自噬相關蛋白4B抗體
豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)免疫試劑盒 AFAP 微絲相關蛋白1抗體
豬胰島素樣生長因子1(IGF-1)免疫試劑盒 ADORA1 腺苷A1A受體抗體
豬胰島素(INS)免疫試劑盒 ARSB 芳基硫酸酯酶B抗體
豬(Trypsin)免疫試劑盒 ABAT γ氨基丁酸轉氨酶抗體
豬一氧化氮(NO)免疫試劑盒 A2BP1 共濟失調蛋白2結合蛋白1抗體
豬氧還原蛋白過氧化物酶2(PRDX2)免疫試劑盒 ADAM17 壞死因子α轉換酶
豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫試劑盒 ARNT2 芳香烴受體核轉錄蛋白2抗體
豬血小板衍生生長因子(PDGF)免疫試劑盒 ABH8 AlkB同源蛋白8抗體
豬血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒 ABI3BP ABI基因家族成員3結合蛋白抗體
豬血纖蛋白原降解產物(FDP)免疫試劑盒 ARHGAP20 Rho GTP酶激活蛋白20抗體
豬血栓素A2(TXA2)免疫試劑盒 ASB10 含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族10抗體
豬血栓調節蛋白(TM)免疫試劑盒 ALDH1L1 乙醛脫氫酶1蛋白家族L1抗體
豬血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒 Axin 2 軸抑制蛋白2抗體
豬血漿(KLKB1)免疫試劑盒 ANGPTL6 血管生成素相關蛋白6抗體
豬血紅蛋白(Hb)免疫試劑盒 AMH Muellerian繆勒管激素抑制因子抗體
豬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)免疫試劑盒 EphA8 蛋白激酶受體A8抗體
豬血管舒緩激肽(BK)免疫試劑盒 Acetoacetyl-CoA synthetase 脂肪酰家族成員1抗體
豬血管生成素2(ANG-2)免疫試劑盒 ARNTL2 芳香烴受體核轉錄蛋白樣2抗體
豬血管生成素1(ANG-1)免疫試劑盒 phospho-AANAT (Thr29) 磷酸化芳香胺N-乙?;D移酶抗體
豬血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1)免疫試劑盒 ABLIM1 肌動蛋白結合蛋白1抗體
豬血管內皮細胞生長因子(VEGF)免疫試劑盒 AMIGO2 粘附分子IgG樣結構域蛋白2抗體
豬血管內皮鈣粘著蛋白復合體(VE-cad)免疫試劑盒 Advillin 肌動蛋白結合蛋白DOC6抗體
豬血管緊張素轉化酶2(ACE2)免疫試劑盒 AFG3L2 AFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟失調蛋白28抗體
豬血管緊張素轉化酶(ACE)免疫試劑盒 AIP1 激活素受體相互作用蛋白1抗體
豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒 AKR7A2 醛固酮類還原酶家族7成員A2抗體
豬血管活性腸肽(VIP)免疫試劑盒 AKT1+2+3 蛋白激酶AKT1,2,3抗體
豬旋毛蟲IgG抗體免疫試劑盒 ATP13A2 帕金森病相關蛋白ATP13A2抗體
豬β4(Thymosin β4)免疫試劑盒 ALS2 肌側索硬化蛋白2抗體
豬心型脂肪酸結合蛋白(FABP3/FABP11/MDGI)免疫試劑盒 phospho-ATM (Tyr170) 磷酸化毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體
豬心鈉肽(ANP)免疫試劑盒 ACADL ?;摎涿搁L鏈抗體
豬心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)免疫試劑盒 APC5 細胞分裂周期蛋白5抗體
豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒 beta-Amyloid 1-42(CT) β淀粉樣肽/Aβ42抗體
豬?;ワ柡兔?SCD)免疫試劑盒 ADCK4 ADCK4蛋白抗體
豬纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)免疫試劑盒 AIMP3 抑癌蛋白AIMP3抗體
Smart Assembly Cloning kit豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)免疫試劑盒 AKAP associated Sperm Protein 相關蛋白AKAP抗體
豬氧化酶(COX)免疫試劑盒 AKAP6 蛋白激酶A錨定蛋白6抗體
豬還原酶(CCR)免疫試劑盒 ABHD1 肺α/β水解酶蛋白1抗體
豬細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫試劑盒 ABHD13 水解酶結構域蛋白13抗體
豬細胞間粘附分子2(ICAM-2)免疫試劑盒 ABHD14B 水解酶結構域蛋白14B抗體
豬戊糖素(PE)免疫試劑盒 ABHD15 水解酶結構域蛋白15抗體
豬瘟抗體免疫試劑盒 ABHD3 肺α/β水解酶蛋白3抗體
豬瘟抗體(IgM)免疫試劑盒 ABCF3 三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白F亞基3抗體
豬瘟抗體(IgG)免疫試劑盒 ABCA5 三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白A亞基5抗體
豬胃泌酸調節素(OXM)免疫試劑盒 ADCK1 ADCK1蛋白抗體
豬偽狂犬病毒(PRV)抗體(IgG)免疫試劑盒 ACBD4 ?;Y合結構域蛋白4抗體
豬(VD)免疫試劑盒 ABHD4 α/β水解酶4抗體
豬褪黑素(MT)免疫試劑盒 ADCK2 ADCK2蛋白抗體
豬透明質酸(HA)免疫試劑盒 ALDH16A1 乙醛脫氫酶16家庭A1抗體
豬鐵蛋白(FE)免疫試劑盒 AMIGO3 粘附分子IgG樣結構域蛋白3抗體
豬糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)免疫試劑盒 AKR1A1 乙醇脫氫酶1抗體
豬胎球蛋白A 免疫試劑盒 ALAD δ氨基乙酰丙酸脫水酶抗體
豬胎盤生長因子(PGF)免疫試劑盒 ALS2CR4 肌側索硬化癥相關蛋白4抗體
豬髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒 alpha 2 Macroglobulin α2巨球蛋白(α-2M)抗體
豬髓過氧化物酶(MPO)免疫試劑盒 ACCSL ACCSL蛋白抗體