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上海莼試生物技術有限公司
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上海市
更新時間：2024-10-10 13:06:19瀏覽次數：39
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本產品僅供科學實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！
產品名稱 | 組織來源 | 羊膜 | |
產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 產品貨號 | CS-X3599 |
細胞簡介：
小鼠羊膜間充質干分離自胎盤羊膜組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發育，依靠胎盤從母體取得營養，而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合，以達到母子間物質的交換，這樣的結構稱假胎盤。羊膜是胎盤的內層，與眼結膜組織結構相似，含有眼表上皮細胞，包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質，其光滑，無血管、神經及淋巴，具有一定的彈性；在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質細胞組成，均具有多分化潛能，可轉化為神經元，且還有合成、釋放生物活性物質和神經營養因子的功能。
原代細胞培養條件：
?溫度?：通常在37℃下進行，以模擬體內溫度。
?pH值?：培養液的pH值應保持在7.2~7.4之間，以維持細胞的正常生理狀態。
?氣體環境?：在含有5% CO2的培養箱中進行，以促進細胞生長。
?培養基?：使用含有適當營養成分的培養基，如Eagle's MEM、DMEM等。
?無菌操作?：整個培養過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。
方法簡介：
實驗室分離的小鼠羊膜間充質干經CD44免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
質量檢測：
實驗室分離的小鼠羊膜間充質干采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
培養信息：
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
原代細胞培養的具體操作步驟如下：
?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細胞。
?細胞計數?：使用血細胞計數器或其他方法對細胞進行計數，確保細胞密度適中。
?接種培養?：將細胞懸液接種到培養瓶中，加入適量的培養基，置于37℃、5% CO2的培養箱中培養。
?換液和傳代?：定期更換培養液，當細胞達到一定密度時進行傳代培養，以維持細胞的生長狀態。
原代細胞的4種培養方法：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用
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