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南京億迅生物科技有限公司
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| 參考價 | ￥ 4270 | ￥ 3200 |
| 訂貨量 | 1件 | 5件 |
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- 所在地 南京市
更新時間：2019-11-07 14:56:30瀏覽次數：774
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結合態淀粉合成酶(GBSS)檢測試劑盒
測定原理
GBSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應,將葡萄糖分子轉移到淀粉引物上，同時生成ADP；進一步通過反應體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH，其中NADPH生成量與前一步反應生成的ADP數量呈正比，通過340nm下測定NADPH的增加量，可以計算GBSS活性。
需自備的的儀器和用品
紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液：液體60mL×2瓶，4℃保存；
液體一：7mL×2瓶，4℃保存；
液體二：4mL×2瓶，4℃保存；
液體三：8mL×2瓶，4℃保存；
粉劑一：2支，4℃保存；
粉劑二：2支，4℃保存；
粉劑三：2支，-20℃保存；
粉劑四：2支，4℃保存；
粉劑五：2支，4℃保存；
粉劑六：2支，-20℃保存；
粉劑七：2支，-20℃保存；
粉劑八：2支，4℃保存；
粉劑九：2支，4℃保存；
粉劑十：2支，-20℃保存；
試劑一：粉劑×1支，-20℃保存；臨用前加入500μL雙蒸水，充分溶解備用，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：粉劑×1支，-20℃保存；臨用前加入500μL雙蒸水，充分溶解備用，用不完的試劑4℃保存；
反應液Ⅰ的配制：臨用前取液體一、粉劑一、粉劑二和粉劑三各一支，依次把粉劑一、粉劑二和粉劑三轉移到液體一中混合溶解。這樣可以分兩批配制并且測定。
反應液Ⅱ的配制：臨用前取液體二、粉劑四、粉劑五、粉劑六和粉劑七各一支，依次把粉劑四、粉劑五、粉劑六和粉劑七轉移到液體二中混合溶解。這樣可以分兩批配制并且測定。
反應液Ⅲ的配制：臨用前取液體三、粉劑八、粉劑九和粉劑十各一支，依次把粉劑八、粉劑九和粉劑十轉移到液體三中混合溶解。這樣可以分兩批配制并且測定。
粗酶液制備
稱取約0.1g組織加入1mL提取液，冰浴中勻漿。10000g ，4℃離心10min，棄上清，在沉淀中加入1mL提取液充分混勻，置冰上待測。
測定步驟
試劑名稱（μL） | 測定管 |
樣本 | 150 |
反應液Ⅰ | 270 |
混勻，30℃保溫20 min，置沸水浴中1 min（蓋緊，防止水分散失），冰浴冷卻
反應液Ⅱ | 150 |
混勻，30℃保溫30 min，置沸水浴中1 min（蓋緊，防止水分散失），
冰浴冷卻，10000g 常溫離心10min，取上清液
上清液 | 450 |
反應液Ⅲ | 300 |
試劑一 | 10 |
試劑二 | 10 |
混勻后立即在340 nm波長下記錄初始吸光度A1和 2min后的吸光度A2，計算ΔA=A2-A1。
注意：反應液Ⅰ如有沉淀，加入之前要使之充分溶解混勻。
結合態淀粉合成酶(GBSS)檢測試劑盒
