南京億迅生物科技有限公司
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訂貨量 | 1件 | 5件 |
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更新時間:2019-11-07 14:51:16瀏覽次數:1077
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糖原含量檢測試劑盒
測定意義:
糖原是由葡萄糖單位構成的高分子多糖,是糖的主要的儲存形式之一,主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量,分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調節血糖濃度,當血糖升高時可在肝臟合成糖原,血糖降低時,肝糖原則分解為葡萄糖以補充血糖。因此,肝糖原對維持血糖的相對平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲存形式,在劇烈運動消耗大量血糖時,肌糖原不能直接分解成血糖,必須先分解產生乳酸,隨血液循環到肝臟,通過糖異生轉變為肝糖原或葡萄糖。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、濃硫酸(不允許快遞)和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:0.1mg/mL 的葡萄糖標準液 10mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×2瓶, 4℃保存;
工作液的配制:臨用前在每瓶試劑二中倒入5mL蒸餾水,緩慢倒入20mL濃硫酸,充分溶解混勻后使用。
糖原提取:
1﹑細胞或細菌:收集500萬細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;加入0.75mL提取液超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復30次);轉移至10mL試管中,置于沸水浴中煮沸20min(蓋緊,防止水分散失),隔5min振搖試管1次,使充分混勻;取出試管冷卻后,用蒸餾水定容到5ml,混勻。
2﹑組織:稱取約0.2g樣品,置于10ml試管中;加入0.75ml提取液,置于沸水浴中煮沸20min(蓋緊,防止水分散失),隔5min振搖試管1次,使充分混勻;待組織全部溶解后,取出試管冷卻后,用蒸餾水定容到5ml,混勻。
步驟和加樣表(在1.5mLEP管中反應):
試劑(uL) | 空白管 | 標準管 | 測定管 |
糖原提取液 |
|
| 250 |
試劑一 |
| 250 |
|
蒸餾水 | 250 |
|
|
試劑二 | 1000 | 1000 | 1000 |
混勻,置沸水中10min(蓋緊,防止水分散失),冷卻,于620nm波長處,以蒸餾水調零,分別讀取空白管、標準管和測定管吸光度,分別記為A1、A2和A3。
注意:空白管和標準管只要測一次。
糖原含量檢測試劑盒