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南京億迅生物科技有限公司
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更新時間：2019-11-07 11:22:35瀏覽次數：515
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土壤中性磷酸酶(S-NP)檢測試劑盒
測定意義：
土壤磷酸酶是催化土壤有機磷礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉化及其生物有效性，是評價土壤磷素生物轉化方向與強度的指標。磷酸酶活性受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH的顯著影響，根據適PH范圍，一般把土壤磷酸酶分為中性、酸性和堿性三種類型。
測定原理：
中性環境中，S-NP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉，通過測定酚的生成量即可計算出NP活性。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、37℃恒溫培養箱、分析天平、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、蒸餾水、乙醇和甲苯。
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。用前加50mL蒸餾水充分溶解。
試劑三：液體×1瓶，4℃保存。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1152μL無水乙醇（自備），48 μL蒸餾水充分溶解。（變褐色后不能再使用）
標準品：液體×1瓶，2 μmol/mL酚標準液，4℃保存。
催化反應：
稱取風干混勻土壤約0.1g，加入0.05mL甲苯（自備），輕搖15min；加0.4 mL試劑一并且搖勻后，置于37℃恒溫培養箱，開始計時，催化反應24h；到時后迅速加入1mL試劑二充分混勻，以終止酶催化的反應。10000rpm室溫離心10min，取上清液置于冰上待測。
顯色反應：
1. 分光光度計預熱30 min以上，調節波長到660 nm，蒸餾水調零。
2. 空白管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL蒸餾水，100 μL試劑三，20 μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水830 μL，混勻后室溫靜置30 min，于660 nm測定吸光度，記為A空白管。
3. 標準管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL標準液，100 μL試劑三，20 μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水830 μL，混勻后室溫靜置30 min，于660 nm測定吸光度，記為A標準管。
4. 測定管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL上清液，100 μL試劑三，20 μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水830 μL，混勻后室溫靜置30 min，于660 nm測定吸光度，記為A測定管。
土壤中性磷酸酶(S-NP)檢測試劑盒
