南京億迅生物科技有限公司
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參考價 | ¥ 2135 | ¥ 1600 |
訂貨量 | 1 件 | 5 件 |
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- 廠商性質 生產商
- 所在地 南京市
更新時間:2019-11-07 10:46:14瀏覽次數:585
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蔗糖磷酸化酶檢測試劑盒
測定原理
SP能夠以磷酸為受體,催化蔗糖產生1-磷酸葡萄糖,在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為6-磷酸葡萄糖,在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP+生成NADPH,導致340nm光吸收值增加。測定340nm吸光度增加速率,即可計算SP活性。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。
緩沖液:液體40mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體25mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體2mL×1支,4℃保存。
試劑三:液體1mL×1支,4℃保存。
試劑四:粉劑1瓶,-20℃避光保存,臨用前加5mL雙蒸水溶解。
試劑五:粉劑1瓶,-20℃避光保存,臨用前加5mL雙蒸水溶解。
試劑六:粉劑1瓶,-20℃避光保存,臨用前加10mL雙蒸水溶解。
試劑七:粉劑1瓶,-20℃避光保存,臨用前加10mL雙蒸水溶解。
粗酶液提取
發酵液4℃,10000rpm,離心15min,取菌泥約0.5g,加入1mL提取液,用超聲波進行破碎,功率為300w,破碎3s,間歇5s,總時間為3min,然后4℃,12000rpm,離心10min,取20μL測定蛋白含量,其余的作為待測樣本。
測定操作表
| 對照管 | 測定管 |
緩沖液(μL) | 850 | 650 |
試劑一(μL) | 500 | 500 |
試劑二(μL) | 30 | 30 |
試劑三(μL) | 20 | 20 |
試劑四(μL) | 100 | 100 |
試劑五(μL) | 100 | 100 |
試劑六(μL) | 200 | 200 |
試劑七(μL) | 200 | 200 |
混勻,37℃水浴預熱5min | ||
樣本(μL) |
| 200 |
迅速混勻,于1mL石英比色皿,對照管調零,測定340nm的初始值A1,測定完立即放入37℃水浴準確反應2min,迅速測定340nm吸光值A2,△A= A2- A1。 |
注意事項
- 粉劑-20℃保存,配制好的試劑建議盡快使用。
- 可選用BCA法測定蛋白含量試劑盒測定蛋白含量。
蔗糖磷酸化酶檢測試劑盒