伊萊博生物科技(上海)有限公司
主營產品: 動物行為學檢測,大中小型動物實驗,細胞培養服務 |
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參考價 | ¥ 220 |
訂貨量 | 1 件 |
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- 所在地 上海市
更新時間:2023-10-30 09:05:18瀏覽次數:3154
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實時PCR實驗具體方法
1.SYBRGreen法:
在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。
SYBR定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產物熔解曲線圖(單一峰圖表明PCR擴增產物的單一性)
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物的形成*同步。
二、服務流程
1、引物設計與合成
2、DNA/RNA抽提
3、反轉錄(針對RNA)
4、上機定量分析
三、客戶提供
1、全血、組織或細胞。
2、引物,或由豐核提供。
3、基因信息:目的基因名稱、物種和序列(或GenBank Accession Number)。
四、交付內容
實驗報告:詳細操作步驟
原始數據:溶解曲線圖,擴增曲線圖,ct值
實時PCR實驗服務列表
項目 | 備注 | 周期 |
引物設計與合成 |
| 3個工作日 |
提取 | RNA提取、miRNA提取、DNA提取 | 2個工作日 |
反轉錄 |
| 2個工作日 |
qPCR反應 | SYBR Green方法,相對定量 | 2個工作日 |