大鼠腎上皮細胞 返回列表頁

操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

      發貨：客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h，再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

注意事項：
1. 接收到細胞，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%*-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。

培養步驟：

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

NA酮中醚磺隆溶液標準物質anti- COTL1 antibody小鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒

NA酮中醚菊酯溶液標準物質anti- COTL1 antibody小鼠血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒

DOWEX(R) 1X8酮中氯吡脲溶液標準物質anti- COX-1/Cyclooxygenase-1 antibody小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒

PROTOVERATRINE A酮中嗪草酮溶液標準物質anti- COX10 antibody小鼠絨毛膜*(CG)ELISA試劑盒

NA正己烷中三氯殺螨砜溶液標準物質anti- COX11 antibody小鼠二醛(MDA)ELISA試劑盒

Litium正己烷中滅蟻靈溶液標準物質anti- COX15 antibody小鼠超物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒

Glutamine-S正己烷中氟戊菊酯溶液標準物質anti- COX16 antibody小鼠C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒

Ponceau 2R;Ponceau G;Ponceau R;Ponceau de xylidine;Xylidine ponceau 3KS;Scarlet R;M-Xylene-4,1-azo-2-naphthol-3,6-disulfonic acid sodiuM salt;C.I. 16150水中氯酸鹽標準溶液anti- COX17 antibody小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒

大鼠腎上皮細胞Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..胞漿動力蛋白中間鏈2抗體anti- SMC3 antibody斯鈣素2(STC2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

frozen鋅指蛋白DZIP1抗體anti- SMC4 antibody鈣粘蛋白EGF LAG七經G-型受體2(CELSR2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Penicillium vinaceum Gilman et Abbott, anam ..Notch信號通路Delta樣配體1抗體anti- SMC5 antibody氨基己糖苷酶Aα(HEXα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Mus musculus, mouse多能發育相關基因4抗體anti- SMC6 antibody抑制素βB(INHβB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..無精癥缺失基因4抗體anti- SMCHD1 antibody羧肽酶A3(CPA3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Mus musculus subcutaneous connective tissue ..自然殺傷激活受體相關蛋白DAP12抗體anti- SMCR7,MID49 antibodySlit同源物1(Slit1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..DIP13β抗體anti- SMCR7L antibody存活素(Surv)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..胎盤和前列腺相關蛋白DLG5抗體anti- SMEK2 antibody單核細胞趨化蛋白1(MCP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)