大鼠胎兒表皮角質形成層細胞胞 返回列表頁

收到細胞如何處理？

1、首先，觀察細胞培養瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有，請拍照，（所拍照片將作為后續服務依據）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養瓶蓋，將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時，以便穩定細胞狀態。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態（所拍照片將作為后續服務依據）；建議細胞傳代培養后，定期拍照、記錄細胞生長狀態。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養瓶內培養基，預留5ml左右繼續培養，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養瓶內培養，補加培養基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續培養，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。

       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

      發貨：客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h，再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

細胞培養步驟：

一．培養基及培養凍存條件準備：
1） 準備DMEM-H培養基(GIBCO,貨號1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根據實驗需要選擇懸浮培養基，使293T細胞懸浮生長。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

Sodium borohydride雜散光濾光片anti- Cytokeratin 18 antibody大鼠膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒

MAGNESIUM BORATE鈥玻璃鐠釹玻璃濾光片anti- Cytokeratin 19 antibody大鼠髓系細胞觸發受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒

LEAD (II) BORATE MONOHYDRATE鐠鉺玻璃濾光片anti- Cytokeratin 19 antibody大鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA試劑盒

Triisopropyl borate紅外分光光度計檢定標準器anti- Cytokeratin 19 antibody大鼠酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒

Tributyl borate傅立葉變換紅外光譜儀檢定標準器anti- Cytokeratin 19-specific antibody大鼠酸化細胞外信號調節激酶(pERK)ELISA試劑盒

Borane-tetrahydrofuran complex酶標儀標準濾光片--透射比片anti- Cytokeratin 1-specific antibody大鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒

Hide powder slightly chromated酶標儀標準濾光片--干涉片anti- Cytokeratin 20 antibody大鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒

Trioctyl trimellitate煙度計標準濾光片anti- Cytokeratin 20 antibody大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒

大鼠胎兒表皮角質形成層細胞Homo sapiens, human雌激素受體α抗體（用于western blot）anti- STOML2 antibody神經肽Y受體Y1(NPY1R)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..ENPP3抗體IgGanti- STOML2 antibodyAnoctamin 6蛋白(ANO6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Staphylococcus epidermidis (Winslow and Win ..登革熱病包膜糖蛋白E抗體anti- STOML3 antibody白三烯A4水解酶(LTA4H)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..食道癌相關基因抗體anti- STRA6 antibodyⅪ(F11)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Propionibacterium propionicus (Buchanan and ..EB病核抗原-3A抗體anti- STRADB antibody肽聚糖識別蛋白1(PGLYRP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Homo sapiens, human膠質細胞運載蛋白1抗體anti- STRAP antibody17-β-羥基類固醇脫酶3(HSD17β3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Mus musculus (B cell); Mus musculus (myeloma ..轉錄因子E2F-1抗體anti- STRBP antibodyC-Raf原癌基因絲蛋白激酶(CRAF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Rattus norvegicus (B cell); Mus musculus (my ..內皮素轉化酶1抗體anti- STRN antibody野鼠色基因相關蛋白(AGRP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

公司產品采用干冰運輸，經過逐步的降溫，冷藏在-196℃度的液氮罐中，暫時停止其生命活動，保存其活性，使您的實驗更生動,公司代理品牌有：ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.

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