大鼠腦動脈血管平滑肌細胞 返回列表頁

收到細胞如何處理？

1、首先，觀察細胞培養瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有，請拍照，（所拍照片將作為后續服務依據）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養瓶蓋，將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時，以便穩定細胞狀態。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態（所拍照片將作為后續服務依據）；建議細胞傳代培養后，定期拍照、記錄細胞生長狀態。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養瓶內培養基，預留5ml左右繼續培養，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養瓶內培養，補加培養基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續培養，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。

       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

      發貨：客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h，再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

細胞培養步驟：

一．培養基及培養凍存條件準備：
1） 準備DMEM-H培養基(GIBCO,貨號1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根據實驗需要選擇懸浮培養基，使293T細胞懸浮生長。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

Lecithin Tween-80 Nutrient Agar惡草酸anti- CXCR7 antibody大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒

RhodaMine B;RhodaMine 610;RhodaMine　O;Brilliant　pink　B;Tetraethyl　rhodaMine;N,N,N′,N′-Tetraethyl-2-(6-aMino-3-iMino-3H-xanthen-9-yl)benzoic acid;C.I Basic violet10;C.I Food red 15;Pilot578;R160硝磺草酮/基磺草酮anti- CXCR7 antibody大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒

Basic Red 1酰肼anti- CXorf15 antibody大鼠c-fos ELISA試劑盒

Dibutyltin maleate氯酞酸酯/敵草索anti- CXorf22 antibody大鼠c-jun ELISA試劑盒

Dibutyl Maleate螺環菌胺anti- CXorf26 antibody大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒

NA呋霜靈anti- CXorf56 antibody大鼠吡啶酚(PYD)ELISA試劑盒

N-BENZOYL-GLY-PHE唑嘧磺草胺anti- CXorf61 antibody大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒

Morpholine氯氟吡氧酸酯anti- CXXC5 antibody大鼠骨性酸酶(BALP)ELISA試劑盒

大鼠腦動脈血管平滑肌細胞Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..效應細胞蛋白酶受體1抗體anti- SRY antibody甘油醛-3-酸脫酶(GAPDH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Nocardia wallaceiFBXO36 F-box蛋白相關蛋白36抗體anti- SS18L2 antibody分泌粒蛋白Ⅴ(SCG5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Mus musculus (B cell); Mus musculus (myeloma ..表皮生長因子樣蛋白8抗體anti- SSB antibody煙型膽受體α5(CHRNα5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Aspergillus flavus LinkE3泛素連接酶抗體anti- SSBP1 antibody生長分化因子2(GDF2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Listeria monocytogenes (Murray et al.) Pirie表皮生長因子抗體anti- SSH3 antibody含卷曲螺旋C2域蛋白1A(CC2D1A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Spongipellis galactinus (Berkeley) Patouill ..小鼠抗表皮生長因子抗體anti- SSR4 antibody鋅結合α2-糖蛋白1(αZGP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Coprinus cinereus (Schaeffer : Fries) Gray, ..抗表皮生長因子抗體anti- SSRP1 antibody斯鈣素1(STC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

freeze-driedEpsin2B蛋白抗體anti- SSSCA1 antibody絲蛋白結合LIM蛋白1(FBLIM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

公司產品采用干冰運輸，經過逐步的降溫，冷藏在-196℃度的液氮罐中，暫時停止其生命活動，保存其活性，使您的實驗更生動,公司代理品牌有：ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.

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