尋常圓線蟲PCR檢測試劑盒 返回列表頁

產品及特點：
本產品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑，得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速，尤其適合于大規模的轉基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速，整個過程只需要15分鐘左右，不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式，在一個試管內完成所有操作，不容易交叉污染。常溫運輸及保存，有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR，剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化，適合于海關和企業進行大規模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數植物葉和種子。

本試劑盒不但準確、快速、靈敏，還具有以下特點：
1.  即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單。
2.  預期的 PCR 產物長度為 494 bp。
3.  本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

使用及效果：將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當的其他形狀）的植物葉直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1  確定PCR反應液或其他酶促反應液的體積。將PCR反應液或其他酶促反應液轉移至一個新的1.5 ml離心管中，向其中加入等體積溶液BD?；旌暇鶆?。
2  將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中，靜置2min。
3  12,000 rpm離心1min，棄濾液。
   注：此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
       若溶液體積大于純化柱容積（800 μl），可分兩次離心。
4  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min，棄濾液。
   注：溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋，即含80%乙醇。
       此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質，以獲得高質量DN段。
5  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min，棄濾液。
6  12,000 rpm 離心 3min，以*去除純化柱中的液體。
   注：此步驟的作用是去除殘留乙醇，避免殘留乙醇影響后續酶促反應。同時也利于DN段的充分溶解。
7  將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處，懸空滴加30-100 µl溶液Eluent（60℃預熱），靜置2min。12,000 rpm 離心1min，管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
   注：溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替，但其pH需為8.0-8.5，加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
       對溶液Eluent 60℃預熱，會提高提取DNA目的段的產量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀釋陽性對照（以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭，在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中，得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應（20  μL 體系，在樣品制備室進行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待測樣品需要做三次重復，下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加）

YSG培養基250g用于清汁、濁汁、水和濃縮果汁中的耐熱耐酸菌的檢測。

Penicillin -Steptomycin" 每毫升合劑含5000U*和5000U*，保存：-5 - -20° 15070-063 100ml Penicillin -Steptomycin" 每毫升合劑含5000U*和5000U*，保存：-5 - -20° 15070-063 100ml

黑曲霉 模式菌株。產纖維素酶、蛋白酶 支/瓶

巧克力瓊脂平板(9cm)用于嗜血桿菌、奈瑟氏菌分離培養

PotatoDextroseWaterO-去甲*(D,L)  進口分裝  小鼠Active Caspase-3

*鈉/西林鈉  進口分裝  小鼠環氧化酶-2 (mouse COX-2)

*  進口分裝  小鼠二肽基肽酶Ⅳ(mouse DPP4)

*（國產)  進口分裝  小鼠糖化血紅蛋白(mouse HbA1c)TSPAN7 Others Cynomolgus 食蟹猴 TALLA-1 / TSPAN7 人細胞裂解液 (陽性對照)

非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2

CL-0237U251(人膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×2

MM96L細胞，黑色素瘤細胞 人急性成髓細胞白血病,Kasumi-1細胞 人導管瘤細胞;BT-474

A2780(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2

IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 1-77) 人細胞裂解液 (陽性對照)
尋常圓線蟲PCR檢測試劑盒毛木耳(紫木耳、黃背木耳)

白色念珠菌CMCC98001凍干粉

粟褐芽孢桿菌

煙曲霉

貝酵母

嗜熱鏈球菌無花果曲霉支/瓶  進口分裝  對溴苯氧乙酸(>95%,Ind Grade)  4-Bromophenoxyacetic acid  ：  1878-91-7  質量規格：  >95%,Ind Grade

雪白根霉檢測用菌支/瓶  進口分裝  雙酚芴(>98%,BR)  9,9-Bis(4-hydroxyphenyl) fluorine  ：  3236-71-3  質量規格：  >98%,BR

異常漢遜酵母支/瓶  進口分裝  α-肉桂酸(>98%,BR)  alpha-Methylcinnamic acid  ：  1199-77-5  質量規格：  >98%,BR

圓酵毛殼利用D-木糖產酒精支/瓶  進口分裝  磷鉬酸銨(>96.5%,BR)  Ammonium phosphomolybdate , hydrate  ：  54723-94-3  質量規格：  >96.5%,BRSCN2B Others Human 人 SCN2B 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚胎皮膚成纖維細胞;HES

C57BL/6小鼠胚胎干細胞 C57BL/6 mouse embryonic stem cells

RPMI-8226細胞，人多發性骨髓瘤細胞 單核細胞增生李斯特氏菌 SV40T轉化人臍靜脈內皮細胞;PUMC-HUVEC-T1

TT(人甲狀腺導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2

HSC-T6(大鼠肝星形細胞) 5×106cells/瓶×2 hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細胞 人原胚腎轉化細胞;293 Ad5