PKH26紅色熒光細胞鏈接試劑盒 返回列表頁

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數值為橫軸，繪制標準曲線

本試劑盒不但準確、快速、靈敏，還具有以下特點：
1.  即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單。
2.  預期的 PCR 產物長度為 494 bp。
3.  本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
包裝規格及成分：

技術原理：

       DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。

胰酪胨大豆瓊脂培養基(β-內酰胺酶)90mm 10 個/包

熱帶念珠菌ATCC750凍干粉

普雷恩毛霉

黃萎輪枝孢

科恩根霉

粘性Gallaminetriethiodide加拉1克GR，容量標準

134678-17-4溶液混合物ALaMivudine Resolution Mixture A

4,5,6,7-Tetraxy7no-2-benzothiopxene-1-carboxylic acid 6435-75-2

異丙烯基酯 Isopropenyl ate,97% 57933-83-2 1G 通用試劑

順丁烯二酸二丁酯/馬來酸二丁酯/失水蘋果酸二丁酯/馬來酸二正丁酯/DBM CP，98.5% 100毫升 國產/進口高鹽察氏瓊脂  進口分裝  3,5-二-L-酪酸  3,5-Diiodo-L-tyrosine  ：  300-39-0  質量規格：  BR，98%

PotatoDextroseAgar（Chloramphenicol）  進口分裝  鹽酸尼非卡蘭(標準品)  Nifekalant hydrochloride  ：  130656-51-8  質量規格：  HPLC>99%,標準品

YPDAMedium  進口分裝  糖原,α-1,6 葡聚糖,糖元  Glycogen from oyster  ：  9005-79-2  質量規格：  BR,>99%,河蚌提取,Type II

麥芽汁培養基  進口分裝  Z-Arg(Mtr)-OH•CHA  Z-Arg(Mtr)-OH•CHA  ：  80745-09-1  質量規格：  0.98
 PKH26紅色熒光細胞鏈接試劑盒白黃側耳、紫孢平菇、姬菇

玫瑰紅鈉表面培養基60mm/25cm2

瓊氏不動桿菌

綠色木霉=木素木霉

清酒酵母

產酸克雷伯氏菌DietxyleneGlycol二甘醇試劑級透明，無色，粘性液體RTsigma

血瓊脂基礎培養基NA

副溶血性弧菌增菌液5克

異魯米諾 Isoluminol,98% 3682-14-2 1G 通用試劑

Thrombin 9002-4-4 1KU 酶和CLY Others Human 人 ACLY / acly / ATP ciate lyase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人毛細胞RNAHHDPC miRNA5 μg

大耳山羊腎細胞;LDG-2

SK-N-MC細胞，神經上皮瘤細胞 鼠骨髓瘤細胞,P3/NS1/1-Ag4-1細胞 人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]

小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT

IL13RA2 Others Mouse 小鼠 IL13RA2 / CD213A2 人細胞裂解液 (陽性對照) 

產品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。