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腎上腺素試劑盒(MN) ELISA試劑盒

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ELISA 試驗時,注意事項如下:

1.　正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性.有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉.

2.　在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:

(1)　固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等.其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等.目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板.不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好.

(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間.吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時.蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值.選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度.對于多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml.

(3)　酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份).然后再固定其它條件或采取"方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度.腎上腺素試劑盒(MN) ELISA試劑盒

(4)　酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色.有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護.有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體.底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應.通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜.底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入

具體事項請.