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北京超越世界科技發展有限公司
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Nexera-e所提供的全二維液相色譜法通過將兩種獨立的分離模式相結合，進一步拓展了液相色譜法的可能性
Nexera-e所提供的全二維液相色譜法通過將兩種獨立的分離模式相結合，進一步拓展了液相色譜法的可能性。
在藥物雜質、蛋白質酶解物、食品提取物等天然物質或合成聚合物等復雜樣品的分析，利用Nexera-e所得到的新的分析結果，加深了對分析對象的理解，獲得全新的見解。
在1個峰內含有若干成分吧？樣品越復雜、類似成分越多，則在1個峰中就越有可能含有多個成分。單一分離系統無法分離的成分，如果使用互相獨立的2個系統的話，則可以實現分離。
如上例所示的峰，在單一分離系統中重疊的成分，通過使用2個分離系統實現了分離。另外，1維LC確認到74個峰，而通過使用Nexera-e，在同一分析時間內檢測出超過200個峰。
全二維液相色譜將兩種獨立的分離系統加以結合，可大幅度地提高分離性能，是全新的分析方法。通過多個分離系統的組合，可以分離使用一維LC難以分離的成分，為此，可應用于復雜樣品的分析。另外，與一般的二維LC不同，獲取的數據反映出第1維與第2維雙方的分離結果，可限度地應用雙方的分離系統。
| 復雜樣品分離不充分，造成峰重合 | 將一維分離的成分進一步以第2根色譜柱進行分離， 即使復雜的樣品也可實現高分離 |
通常的1維LC與Comprehensive 2D-LC的差異
全二維液相色譜將一維系統的洗脫液在二維譜圖上進一步細致地分割解析，在線連續地在二維系統實施分離。通過2個環路的閥構成一維與二維系統相交的流路結構，切換閥使這些環路交替地重復進行一維洗脫液分割和向二維系統注入的動作。
全二維液相色譜系統的流路與動作
全二維液相色譜分析的優點不僅僅是高分離。在二維譜圖上，維軸與第二維軸可分別為不同的分離條件，因此，各成分的物性與圖上的位置相關。在二維譜圖上進行解析，可對具有類似結構的化合物分組，可直接觀察到各成分群，或在圖上解析未知成分的性質。
磷脂39成分的同時分析
PG：磷脂 PE：磷脂酰乙醇胺 PA：磷脂酸
PI：磷脂酰肌醇 PS：磷脂?！C：磷脂酰
磷脂各成分通過第1維正相系統基于極性基團種類進行分離，通過第2維反相系統基于脂肪酸鏈長進行分離。
上圖按種類分組表示各成分。
磷脂有以正離子模式較強檢出的成分和以負離子模式較強檢出的成分，但利用LCMS-8050的高速正負離子切換［UFswitching］檢測，可以在1次分析中獲得兩組數據。
為實現全二維液相色譜，要求各構成組件具有性能。比如，二維分析系統滿足超快速梯度分析，即高流量且超高壓的送液要求。并且，為了解析樣品間的差異，還要求在上述分析條件下具有非常高的保留時間重現性。 Nexera-e采用具有水平的Nexera X2的各組件，具備充分滿足上述嚴苛要求的性能。比如，送液單元LC-30AD可至3 mL/min的高流量區域，并以130 MPa耐壓實施送液。與同樣可耐壓130 MPa的高壓流路切換閥FCV-32AH組合，擴大了二維分析系統的選擇范圍。
Nexera-e 系統（PDA型號）
 | Nexera-e采用本公司自行開發的低容量流路切換閥。 全二維液相色譜需要頻繁的切換流路，因此，如果閥的密封因磨損易產生粉末，則可能在分析中造成流路堵塞等，有可能對分析產生重大影響。流路切換閥FCV-32AH采用了在開發Nexera X2的自動進樣器過程中培育優異技術，排除了這種擔心。 |
 | 對于基本上以超快速分析為主的全二維液相色譜來說，檢測器的高速采樣也非常重要。 Nexera X2的光電二極管陣列檢測器SPD-M30A達200 Hz，三重四極桿型質譜儀LCMS-8050也通過采用UFMS技術而實現了超高速掃描，可從容地采集數據。 |
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標準品分析中各成分的保留時間重現性（n=6）
（1: Acetanilide, 2: Methyl paraben, 3: Acetophenone, 4: Propyl paraben, 5: Butyrophenone, 6: Benzophenone, 7: Hexanophenone)
數據采集所獲得的數據通過全二維液相色譜解析軟件ChromSquare變換為二維等高線數據。色譜圖上的峰在等高線數據上被識別為點，以這個點為單位進行定性·定量解析處理。
磷脂標準樣品的LC×LC/MS數據解析
（左上：等高線圖（放大），左下：MS譜圖，右上：第2維的色譜圖，右下：等高線圖（整體））
隨著指針的移動，顯示表示MS譜圖。比如，可以對有特征的點簡便地使用MS譜圖進行定性分析。
與通常的HPLC分析相同，可根據標準樣品的分析結果制作標準曲線，根據此標準曲線進行未知樣品的定量分析。
 點整體的MS譜圖（紅線）和數據點的MS譜圖（藍線） |  標準曲線 |
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