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更新時間:2024-06-30 07:47:28瀏覽次數:149次
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NucleoCounter是ChemoMetecA/S開發的具有新技術的產品,它解決傳統細胞計數的問題
NucleoCounter是ChemoMetec A/S開發的具有新技術的產品,它解決傳統細胞計數的問題。它適合研究和生產應用(T-瓶、生物反應器、微載體等)中對培養的哺乳動物細胞進行計數。NucleoCounter核心是內置的熒光顯微鏡設計,包括LED激發光源,光學元件(棱鏡、激發和發射光濾片)和CCD,檢測單個哺乳動物細胞信號。NucleoCounter分析結果是直接的細胞濃度,比間接方法結果更準確。 ·操作簡單 ·分析快速(30秒分析時間) ·無需校正 ·不需要清洗 ·無需維護保養 ·體積小,方便便捷 NucleoCounter可用于研究和生產,其使用簡單,的分析速度和精度,使它也同樣適用于的研究應用和日常測量。
◆原理: ChemoMetec A/S的NucleoCounter是內置的熒光顯微鏡設計,檢測與細胞核酸結合的熒光染料PI的信號。NucleoCounter分析的結果是總細胞濃度或死細胞濃度,取決于樣品的處理。 ◇碘化丙啶 碘化丙啶(PI)是一種熒光分子和高選擇性DNA染料,PI可與雙鏈DNA(dsDNA)高效結合,一旦與DNA結合,激發和發射光波長轉換,與游離的 PI(沒有結合DNA)相比,熒光強度提高20-30倍(提高了信噪比),從而顯著提高測量精度。不同細胞(不同的細胞大小或細胞形態)的細胞核大小基本上是一致的,因而不需要校正。 ◇碘化丙啶排斥法(PIE) 具有完整細胞膜的活細胞DNA實際上是不會被PI染上色,因而,活細胞在分析前需要破壞細胞膜;另一方面,死細胞的細胞膜可透過PI,因而死細胞不需要裂解就可以染上色。 ◆PI排斥法測定細胞活力 對懸浮細胞用碘化丙啶排斥法(PIE)和結合總細胞計數方法,可以算出死細胞和活細胞的比例。PIE方法分析細胞活力原理是基于分析的細胞膜對PI的滲透特性。
◆應用: NucleoCounter能分析哺乳動物細胞的總數(濃度)、死細胞總數(濃度)、活細胞數(濃度)和細胞活力,因而,其能用于普通實驗室細胞培養,微載體培養和生物反應器培養等方面的細胞計數和測定細胞活力。 ◇操作非常簡單 ·樣品處理 將細胞樣品與等體積的試劑 A-100(裂解/分散緩沖液)和試劑B(穩定緩沖液) ·上樣 將分析板的頭部浸入裂解好的液體中,按下活塞,將溶液吸入分析板中 ·分析 將分析板放入設備中,按下“Run”鍵。30秒后,細胞計數會在設備的屏幕上顯示。數據也可通過USB接口傳送到外部電腦中或在外部打印機上打印 NucleoCassette 板 ·PI固定在一次性NucleoCassette板的內部,當細胞裂解液進入到Cassette板內,PI溶解,細胞DNA被染上色 ·Cassette放入NucleoCounter后,染色混合物自動轉到NucleoCassette分析室中。綠色光激發PI-DNA產生紅色光,CCD相機檢測發出的紅光,進行細胞計數 ·樣品分析后,PI留在NuleoCassette內,可安全地丟棄,這樣提供了安全的樣品處理 ·每塊NucleoCassette分析室厚度都經過嚴格檢測,可精確決定每個測量的分析體積,這個特性加上耐用的光學元件,使NucleoCounter無需校正 ·由于NucleoCassette包含整個流路系統和測量室,因而NucleoCounter不需要清潔和維護
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