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上海研盟生物科技有限公司
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上海研盟生物提供美國ATCC傳代細胞株“P19細胞,小鼠畸胎瘤細胞"，進口來源，國內保種，活性保證，咨詢：.
【友情提示】：產品價格與說明書請添加客服或來電詢價，索要說明書；
產品名稱：P19細胞,小鼠畸胎瘤細胞
細胞特性
組織來源：胚胎；畸胎癌
培養條件：MEMα（不含核苷和脫氧核苷）+7.5% BCS+2.5% FBS
形態：貼壁；上皮細胞樣
背 景：P19細胞株是從C3H/He小鼠中誘導的惡性畸胎瘤中建立的。該細胞在含有0.1mM 2-巰基乙醇的培養基中可高效率地克隆。該細胞具有多能性，在500nM *誘導下可以分化成神經和神經膠質樣細胞；在0.5%~1.0%二甲亞砜(DMSO) 存在下，分化形成心臟和骨骼肌樣細胞，但不形成神經或神經膠質樣細胞；在DMSO和*同時存在時，細胞的分化與只有*一樣。
含量：>1x10的6次方 個/mL
污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
基本特性：
描述：（1）所有細胞株購自ATCC；
（2） 公司可提供新鮮或凍存細胞株；
（3） 細胞株數量約 1000000個/瓶；
（4） 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
密度超過90%,并且細胞狀態很好時,則復溫后2個小時需要立即傳代，提供復蘇好的細胞株，貼壁及懸浮細胞形式，細胞狀態良好，飽滿、光澤度好，*，并提供細胞報價、所需培養基、種屬來源、組織來源、形態、背景資料等。
P19細胞,小鼠畸胎瘤細胞復蘇方法細胞用途：僅供科研使用。
1．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內液氮迅速氣化而發生爆炸，因此應帶有防護眼睛和手套。
2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。
3．剪開紗布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加10ml培養液，吹打使細胞懸浮。
4．低速離心（500～1000轉/分）5分鐘，取上清后再重復用培養液漂洗、離心。
5．加入培養液適當稀釋后，再移裝入培養瓶中，置溫箱培養，次日更換一次培養液后再繼續培養。
我公司認為購買細胞的客戶有培養細胞的經驗，客戶收到細胞，原瓶里的培養液可以收集繼續使用，在*次消化傳瓶時，我們要求客戶留一瓶細胞繼續使用我們的培養液，其它瓶的細胞客戶可使用自己的培養液，這樣可減少由于細胞不適應培養液導致的細胞問題。
來源有保障（世界*品牌），狀態且傳代次數好，經測試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。每管含有細胞數>1000000個，具有高品質、高純度、高穩定性等特點，純化技術保證產品性能。
運輸方式：活細胞運輸（T-25 flasks）。
細胞純度：95%。
細胞來源：ATCC等。
包裝：內層無菌自封袋，防壓泡沫盒，外層防壓保溫氣泡袋，說明書。
用途：本產品只提供給進一步的科研使用，不可應用于治療等其他方面。
細胞凍存
１．將細胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養基＋１０％ＤＭＳＯ（現用現配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內．
放入－２０度冰箱２－４小時后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存.
本公司的細胞培養操作規程，供參考
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備DMEM培養基(DMEM，GIBCO，貨號11965-092)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，先要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行，zui后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數后離心，用血清重懸浮，加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
傳代時間：2-3天 3-5天
傳代比例：1:2~1:3 1:1~1:2
細胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細胞實驗安全性：所有細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
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細胞描述：來源于日本人的腎臟腫瘤細胞。 可以移植到裸鼠。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。
動物種別：人
組織來源：腎
形態：上皮細胞樣
培養基和添加劑：RPMI-1640(GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。
REFERENCE：Kinouchi, T., Kotake, T., Mori, Y. and Abe, T.,In Vitro Cell Dev Biol,21,195-199,1985. PubMed: 4008433 Liu,S. Q., Shiraiwa,H., Kawai, K., Hayashi,H., Akaza,H., Kim,B. S., Oki,A., Nishida,M., Kubo,T., Hashizaki,K., Sai,K.,Nature Medicine,2,1283,1996. PubMed: 8946818
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