原代細胞培養的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養液。

7、計數：用計數板計數，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養液調整后，分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調整。

8、培養：置于37℃溫箱培養，如用CO2溫箱培養，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。

雞小腸黏膜上皮細胞

商品屬性：

細胞簡介：

雞小腸黏膜上皮分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的，因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切；構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能，其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力，促使食物向下運動。腸黏膜上皮細胞是機體內外環境的重要屏障，持續暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應的起始階段發揮關鍵作用，它決定黏膜免疫反應的發生、性質和強度。

方法簡介：

公司實驗室分離的雞小腸黏膜上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質量檢測：

公司實驗室分離的雞小腸黏膜上皮采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關)，再加上取材，成本等因素，通常會把培養的第一代到第十代以內的細胞統稱為原代細胞。

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數的細胞能夠度過“危機"而繼續傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質發生了改變且帶有癌變的特點，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養物經傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續傳代的培養細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養、種類多、價格便宜、無限傳代等優點，也非常容易在培養、凍存中發生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產品：

小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA 試劑盒 96T/48T

Ai glomerular baseme membrane aibody (TBM) ELISA Kit 人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒

Humanai-EJ-aibody，EJ/GlyRSELISAKit 人EJ抗體/抗甘氨酰NA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforACH(Mouseacetylcholine)ELISAKit小鼠乙酰規格：48T/96T

藥品阿斯巴塘(aspaame)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次

MousephosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒規格：96T/48T

亞鹽快速測試盒   Niite rapid test case

氮快速測定試劑盒    niogen rapid determination kit

軟水硬度測定試劑盒   Water hardness determination kit

氮快速測試盒    niogen rapid test case

大鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)ELISA試劑盒 ，英文名： Alox5 ELISA Kit

Rabbit ai glycoprotein aibody (GP) ELISA Kit 兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒

登革熱病毒Ⅱ型(DFV-Ⅱ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMouseeosinophilcationicprotein,ECPELISAKit小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白規格：48T/96T

體液環氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性熒光定量檢測試劑盒20次

ELISAKitCTX-Ⅰ人Ⅰ型膠原C端肽規格：48T/96T

DKK1重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, Fc 標簽) Protein

P311 protein 增生性瘢痕相關蛋白(抗原 0.5mgP311 protein 增生性瘢痕相關蛋白(抗原)

BCHE重組人 BCHE / Butyrylcholinesterase 蛋白 (His 標簽) Protein

CAPG Protein Human 重組人 CAPG / AFCP 蛋白

FGFR2 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR2 / CD332 蛋白 (Fc 標簽)

雞小腸黏膜上皮細胞P311 protein 增生性瘢痕相關蛋白(抗原 0.5mgP311 protein 增生性瘢痕相關蛋白(抗原)

CAPG Protein Human 重組人 CAPG / AFCP 蛋白

DKK1重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, Fc 標簽) Protein

FGFR2 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR2 / CD332 蛋白 (Fc 標簽)

BCHE重組人 BCHE / Butyrylcholinesterase 蛋白 (His 標簽) Protein