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貨號 | XG-P3132 | 規格 | 100反應、200反應、500反應 |
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包裝 | 盒裝 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
染料法熒光定量PCR試劑盒(抗體修飾)
貨號 | 規格 | 分類 |
XG-P3132 | 100反應 | 提取試劑盒 |
XG-P3132 | 200反應 | 提取試劑盒 |
XG-P3132 | 500反應 | 提取試劑盒 |
①Oligo dT
選擇Oligo dT時,要求RNA必須有Poly A,所以真核生物的mRNA都適用。適合長鏈甚至全長mRNA的RT,對RNA樣品的質量要求較高,不要有明顯的DNA污染、RNA降解和RNA斷裂。假如想探索新的mRNA進行RT反應,建議推薦使用Oligo dT引物。使用Oligo dT引物要比隨機引物和特異性引物的穩定性要好。
②隨機引物
適合各種RNA的RT,尤其適合模板豐度很低的情況(比如某個gene表達量很低)。選擇隨機引物時,第鏈cDNA合成反應中就是以所有的RNA為模板,然后進行PCR反應時設計引物進行特異性擴增。同時要注意隨機引物的量和總RNA量之間的關系,一般建議每5µg總RNA的隨機引物的用量為50ng,如果每5µg總RNA的隨機引物的用量超過250ng,可能會導致小片段產物(<500bp)的增加和長片段、全長產物的降低。
③特異性引物
基因特異性引物(GSP)是某個基因序列的一部分,與模板互補的引物。該引物需要結合目標RNA的已知序列進行設計。由于引物和RNA序列特異性結合,每個目標RNA都需要一套新的基因特異性引物。因此,當分析多種目標時,則需要適用更多的RNA樣本。而且不同引物退火溫度本來就不相同,所以一般不推薦使用。如需要使用特異性引物,建議對退火溫度進行優化。
一、模板DNA:PCR反應需要模板DNA,如從細胞、組織、血液中提取DNA等;
二、引物:PCR反應的兩個引物,分別與模板DNA的兩端配對擴增所需的特定區域,引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物;
三、dNTPs:PCR反應中需要四種dNTPs,包括脫氧腺苷酸(dATP)、脫氧胸苷酸(dCTP)、脫氧鳥苷酸(dGTP)、脫氧胞嘧啶酸(dTTP),用于細胞分裂、DNA合成 等生物學過程,用于PCR擴增的模板DNA鏈的延伸和擴增;
四、Taq DNA聚合酶:PCR反應需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等,用于擴增DNA鏈;
五、PCR buffer溶液:對PCR反應具有緩沖作用,調節反應pH,硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機化合物如甲醛,可增強PCR反應特異性,從而提高反應效率;
六、酶切體系:PCR擴增往往涉及到重組、構建和測序等等實驗步驟,常常需要進行酶切操作。
七、MARK:一種分子量標準,用來判別DNA片段大小的工具。
八、DNA純化試劑盒:用于純化PCR反應產物;
雙芽巴貝斯蟲PCR試劑盒 | 丙型副傷PCR試劑盒 |
防風染料法PCR鑒定試劑盒 | 腸道病毒組PCR檢測試劑盒 |
補體7ELISA試劑盒 | 球孢子菌通用PCR檢測試劑盒 |
suan激meiR型同工meiELISA試劑盒 | 腸道病毒72型RT-PCR試劑盒 |
溶血性鏈球菌熒光PCR檢測試劑盒 | 乙型肝炎病毒A型PCR試劑盒 |
火雞出血性腸炎病毒PCR檢測試劑盒 | 猿猴錐蟲PCR檢測試劑盒 |
鯉浮腫病毒PCR試劑盒 | 產色葡萄球菌PCR試劑盒 |
犬支原體PCR試劑盒 | 腸出血性大腸桿菌血清型PCR檢測試劑盒 |
人CYP17基因多態性檢測試劑盒(PCR-RLFP) | 玉米內源基因IVR核suan檢測試劑盒 |
鯉皰疹病毒通用PCR試劑盒 | 大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒 |
鯉皰疹病毒2型PCR試劑盒 | 細胞毒su相關蛋白AELISA試劑盒 |
犬瘟熱病毒(CDV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) | C-Raf原癌基因絲蘇氨suan蛋白激meiELISA試劑盒 |
雙??虏《?/span>PCR檢測試劑盒 | Anoctamin5蛋白ELISA試劑盒 |
泛su分解meiELISA試劑盒 | 染料法熒光定量PCR試劑盒(抗體修飾)CXC趨化因子受體1ELISA試劑盒 |
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